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紫外分光光度计使用能够通过光谱仪套件产生多个波长的光源,该光谱仪套件在样品之间传递特定波长以产生特定波长的光。吸收光源的待测部分,计算出样品的吸光度值并换算成样品浓度,样品的吸光度与样品浓度成正比。那么紫外分光光度计该如何进行测试呢?接下来由大学物理仪器的小编来讲解一下吧,希望能够对大家有所帮助。
1、波长测量
为了提高测量灵敏度,在定量分析中,入射光的波长应为λmax,即被测物的吸收波长较大。如果λmax有噪声,可以选择另一条灵敏度较低的谱线。但是避免干扰不仅可以选择正确的入射光波长,而且只会增加测量的灵敏度。并且还提高了测量精度。
2、通道宽度
如果狭缝宽度过大,入射光的单色性会变差;如果狭缝宽度太小,入射光的强度会变弱。如果狭缝的宽度太大或太小,灵敏度都会降低,更好的选择是创建更大的狭缝,误差更小。一般所选仪器的槽宽应小于待测样品吸附条宽度的一半,否则测得的吸附值会很低,应选择减小槽宽。以减小的凹槽宽度吸附样品对于大多数测试品种,可以使用2nm的凹槽宽度。
3、控制适当的吸收范围
通过控制待测物的浓度或改变吸附池的厚度来减少测量误差,可以达到更好的吸附范围。一般吸附量应尽量控制在0.1-0.8范围内。
4、选择空白解决方案
空白溶液用于调整吸附测量的零点,可以消除入射光被基体成分反射和吸收所引起的误差。其他溶液、吸收池和溶剂常见的空白溶液根据情况有以下选项。
(1)仅当溶液中的被测组分在被测波长处被吸收时,溶剂才为空。但其他成分不被吸收,可以使用纯溶剂作为缝隙。
(2)如果显影剂或其他试剂被吸收,则试剂是免费的。但待测样品溶液未吸收,请使用不含待测成分的其他试剂进行检测。
(3)如果样品基质被吸收,样品为空白,但显影剂或其他试剂不会吸收它们以使用没有显影剂间隙的样品溶液。
以上四点是有关紫外分光光度计的测试方式的全部内容,如果您还有疑问,可在我们的网站上进行咨询,感谢您的理解与支持!